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BUNSEN本生| 飽和酚 您選對(duì)了嗎?
更新時(shí)間:2023-03-03瀏覽:686次

飽和酚是分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)的重要實(shí)驗(yàn)品,常用于樣本中DNA的提取、RNA的提取等。

飽和酚在核酸純化中有2種,一種為Tris飽和酚,故也稱(chēng)為堿性酚,另一種就是酸性酚,也就是水飽和酚(1)

表1 飽和酚參數(shù)


名稱(chēng)


別名


pH


外觀(guān)


用途


水飽和酚


水平衡酚


<5.0


無(wú)色分層溶液


RNA提取


Tris飽和酚


Tris平衡酚


>7.8


黃色分層溶液


DNA提取

 

試劑成分的作用:

1)用于RNA提取時(shí),則要制備酸性酚,也就是水飽和酚,因?yàn)樵谒嵝詶l件下,RNA被分配于水相,而DNA在有機(jī)相,從而達(dá)到分離獲得RNA的目的。水飽和酚同時(shí)能使蛋白質(zhì)變性、沉淀,從核酸提取液中將蛋白質(zhì)分離除去。

2用于DNA提取時(shí),酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,可以使細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)變性析出。 而Tris的主要作用是防治止酚類(lèi)氧化,若酚類(lèi)氧化,則會(huì)形成醌(兩個(gè)苯環(huán)),醌含有強(qiáng)自由基,會(huì)破壞核酸結(jié)構(gòu)。 同時(shí),由于PH值大于7,在堿性環(huán)境中DNA處于水相,RNA處于有機(jī)相。從而分離上清。

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